首页 期刊 山东医药 小干扰RNA与反义寡核苷酸技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果比较 【正文】

小干扰RNA与反义寡核苷酸技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果比较

作者:张玉峰; 叶坤英; 钟丹 河南中医药大学第二临床医学院; 郑州450002; 井冈山大学医学院
小干扰rna   反义寡核苷酸   rhoa   透明质酸   层粘连蛋白  

摘要:目的对比观察小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果。方法将培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6随机分为siRNA组和ASODN组,两组又分别分为A、B、C、D各4个亚组;siRNA组和ASODN组中的A亚组不转染质粒,C、D、B亚组分别采用siRNA、ASODN技术转染大鼠RhoA特异性Rat1、Rat2质粒及HK-A阴性对照质粒。转染48 h取各组细胞,以RT-PCR技术检测细胞中的RhoA、Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中的透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN)。结果 siRNA组与ASODN组中RhoA、ColⅠmRNA均以C亚组表达量最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均〈0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均〉0.05);siRNA组C亚组RhoA、ColⅠmRNA相对表达量低于ASODN组(P均〈0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均〉0.05)。siRNA组与ASODN组细胞上清液HA、LN水平均以C亚组最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均〈0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均〉0.05);siRNA组C亚组细胞上清液HA、LN水平低于ASODN组(P均〈0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均〉0.05)。结论 siRNA和ASODN均可抑制大鼠HSC-T6细胞的RhoA表达,但siRNA下Rat1质粒所介导的RNA干扰技术相对于ASODN能更有效抑制HSC-T6细胞外基质HA、ColⅠ、LN的生成。

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