摘要:目的观察广藿香醇对于幽门螺杆菌(Hp)酸抵抗能力的影响,并探讨其机制。方法体外培养并鉴定Hp后随机分为5组,受试药高、中、低剂量组分别加入20、10、5mg/L广藿香醇,阳性对照组加入尿素酶(Ure)抑制剂AHA,空白对照组加入等体积DMSO;干预0.5h后应用琼脂稀释法测定Hp菌落数,观察其抗酸能力。通过大肠杆菌系统表达和纯化得到Hp尿素酶A(UreA)、UreB、UreG,取UreA/UreB蛋白混合溶液体外模拟Ure成熟过程,将UreG蛋白单体溶液和镍离子(Ni~(2+))溶液混合,均分别以20、10、5mg/L广藿香醇(受试药高、中、低剂量组)和等体积DMSO处理(对照组);采用Berthelot显色法检测Ure活性,判断Ure成熟度;以原子吸收光谱法检测Ni~(2+)浓度,判断UreG携带Ni~(2+)的能力。结果在中性环境中,受试药各剂量组和阳性对照组与空白对照组Hp菌落数比较无统计学差异;在酸性环境中,受试药各剂量组和阳性对照组均较空白对照组Hp菌落数减少(P均〈0.01),且受试药高剂量组、阳性对照组〈受试药中剂量组〈受试药低剂量组(P均〈0.01)。受试药高、中、低剂量组和对照组Ure活性分别为54.89%±11.47%、63.99%±9.46%、83.88%±11.81%、101.53%±2.55%,Ni~(2+)浓度分别为(0.77±0.24)、(0.80±0.22)、(1.12±0.35)、(1.56±0.42)μmol/L,受试药高、中剂量组〈受试药低剂量组〈对照组(P均〈0.01)。结论广藿香醇可以降低Hp的酸抵抗能力,可能与阻断Ni~(2+)的传递途径和Ure的成熟过程进而抑制Ure活性有关。
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